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和元非洲猪瘟病毒荧光定量PCR快速检测试剂盒说明书(普通装)


非洲猪瘟病毒荧光定量PCR快速检测试剂盒说明书


【主要成分与含量】 试剂盒中含有如下组分:

试剂盒组分

数量

PCR反应液

1管(850µL)

酶混合液

1管(150µL)

阳性对照

1管(100mL)


阴性对照

1管(100mL)


说明书 

1份




 注:收到试剂后,将试剂盒置于-20 ℃条件下保存。

【作用与用途】 用于全血、血清、血浆、精液、淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体、肺、肌肉、环境样品中非洲猪瘟病毒核酸的检测。本试剂盒检测结果仅供临床参考,不能单独作为确诊或排除病例的依据。实验室操作人员应接受过基因扩增或分子生物学方法检测的专业培训,具备相关的实验操作资格。

【用法与判定】

1 用法

1.1 样品采集及处理

1.1.1 活猪样品 无菌采集抗凝血或血清5 mL。  

1.1.2 病死猪解剖样品或屠宰场剖检样品  无菌采集死猪的脾、肺、肾、扁桃体、淋巴结、肌肉等组织样品。2~8℃低温运输至实验室用于检测。

1.1.3 病猪污染的周边环境 采集与病猪相关场所的粪便、饲料、污水样品。2~8 ℃低温运输至实验室用于检测。

1.2 样品处理

详见说明书

1.3 荧光PCR反应

详见说明书


2 结果判定

2.1  质量控制

2.1.1 阳性对照:有典型扩增曲线且Ct值≤35。

2.1.2 阴性对照:Ct值>38或无Ct值,线形为直线或轻微斜线,无指数增长期。

2.2  样品判定:

2.2.1阳性:标本检测结果Ct值≤35且有明显指数增长期,判定检出非洲猪瘟病毒DNA。

2.2.2可疑:标本检测结果Ct值在35~38范围内。此时应对标本进行重复检测,如果重复实验结果Ct值仍在35~38范围内,有明显指数增长期,则判定为阳性,否则为阴性。

2.2.3阴性:标本检测结果Ct值>38或无Ct值,判定未检出非洲猪瘟病毒DNA。

【检测方法的局限性】 本试剂盒检测结果仅供临床参考,对诊疗应结合临床症状、病史及其他实验室检测项目等情况综合考虑,试剂运输、保存不当或配制不准确引起的试剂检测效能下降时,会出现假阴性检测结果;当实验室发生PCR产物气溶胶污染、试剂污染或样品交叉污染,会出现假阳性结果。

【注意事项】(1)实验前请仔细阅读本试剂盒说明书,严格按照操作步骤执行,在操作过程中对时间、试剂体积等精确控制可以获得最好的结果。

(2)核酸处理的有关耗材确保洁净、无DNase/RNase,操作过程尽量低温、快速,完成后进入下一步实验或冻保。

(3)对于顶部采光仪器要带新的一次性PE手套对荧光PCR管封盖,对于底部采光仪器要避免徒手或使用过的手套接触荧光PCR管底,检测过程中使用不带荧光物质一次性乳胶手套。

(4)冻存试剂使用前应于室温下完全融化,瞬时离心使液体完全沉于管底,吸头尽量在液体表层吸取,使用后立即放回-20 ℃。建议避免反复冻融,以免影响试剂性能。

(5)样品、阳性对照等在使用后及时封盖,避免组分间及气溶胶等的污染造成假阳性。

(6)实验产生的废弃物应及时收集,远离PCR实验室进行无害化处理。

【规格】 50头份/盒


【贮藏与有效期】 试剂盒放于-20 ℃保存,有效期为12个月。